Даследавання стану гемастазу
Исследования свертывающей и противосвертывающей систем крови в плановом порядке проводятся на автоматическом анализаторе гемостаза «STA compact» производства «Diagnostica STAGO », Франция.
«STA compact» фирмы «Diagnostica STAGO «, Франция | «ACL 10 000 ElitePRO» фирмы «Instrumentation Laboratory», США |
---|---|
Подготовка к исследованию: взятие крови желательно производить натощак. Необходимо учесть, что длительное пережатие сосудов во время взятия крови и «работа рукой» повышают концентрацию параметров в плазме крови.
Материал для исследования: плазма крови, бедная тромбоцитами. Антикоагулянт – цитрат натрия 3.2%.
Для получения достоверных результатов исследований системы гемостаза необходимо строгое соблюдение основных правил:
1. Существенное значение имеет, на какой крови выполняется тот или иной тест. Капиллярная кровь как диагностический материал имеет ограниченное значение:
- сложнее стандартизировать исследование,требуются специальные реактивы и оборудование.
Капиллярная кровь может использоваться только для:
- подсчета тромбоцитов,
- определения времени кровотечения,
- определения протромбинового времени для контроля за приемом непрямых антикоагулянтов в домашних условиях,
- экспресс-диагностики у детей первых месяцев жизни.
Венозная кровь - основной источник материала.
2. Длительность венозного стаза (наложения манжеты) при заборе крови не более 1мин.
Стаз крови вызывает:
- активацию фибринолиза,
- повышение концентрации факторов свертывания из-за освобождения белков из сосудистой стенки,
- активацию тромбоцитов.
3. Кровь берут из локтевой вены утром натощак иглой с широким просветом аккуратно.
Если кровь брать слишком быстро, то из-за турбулентного движения крови в шприце и смешивании ее с воздухом (вспенивание) происходит:
- активация тромбоцитов (изменяется форма, освобождаются тромбоцитарные факторы);
- активация факторов свертывания крови.
Если кровь брать медленно в шприце может начаться необратимое свертывание опять же из-за активации факторов свертывания.
4. Кровь рекомендуется брать «бабочкообразной» иглой в градуированную пластиковую пробирку, содержащую антикоагулянт. Стеклянные пробирки использовать нельзя.
5. Антикоагулянт - цитрат натрия - является стандартным в гемостазиологии. В соответствии с рекомендациями ВОЗ концентрация должна быть 3.2%. Кровь смешивают в соотношении 9:1.
На этом этапе допускаются 3 ошибки:
- неточность приготовления раствора стабилизатора. Хранение раствора цитрата допускается в течение 1 недели при +2 - +8ОС,
- нарушается принятое соотношение крови и антикоагулянта,
- плохое или недостаточное перемешивание крови с антикоагулянтом.
6. Транспортировка проб: согласно международным рекомендациям (ARUP Laboratories, 2002) срок доставки проб в лабораторию для исследования показателей гемостаза не должен превышать 45 минут после взятия крови у пациента.
Только обеспечение качества на всех этапах лабораторного исследования позволит специалистам клинической лабораторной диагностики гарантированно производить и передавать клиницистам диагностическую информацию высокого качества.
Спектр исследований:
- АЧТВ,
- ПВ с выражением в виде МНО,
- фибриноген (по Клауссу),
- тромбиновое время,
- антитромбин III,
- D-димеры,
- факторы свертывания крови,
- ингибитор VIII и IX факторов свертывания крови,
- волчаночный антикоагулянт согласно рекомендациям
- International Society Thrombosis and Hemostasis, 2005.
Применяемые аббревиатуры исследуемых параметров соответствуют международным стандартам:
APTT — Activated Partial Thromboplastin Time (активированное частичное (парциальное) тромбопластиновое время, кефалин-каолиновое время:
- применяется для выявления суммарной активности факторов внутреннего (XII, XI,
- IX, VIII) и общего (X, V, II, I) путей образования фибрина;
- является тестом лабораторного контроля гепаринотерапии.
АЧТВ: этим тестом определяют время (в сек) образования сгустка после добавления каолин-кефалиновой смеси и хлорида кальция к бестромбоцитарной плазме. Однако результаты исследования АЧТВ в плазме обследуемого должны быть представлены не только в секундах:
- сек — результат пациента;
- Ratio — соотношение фактической величины показателя к величине его контрольного значения в день исследования (референсная величина 0.8–1.2). Унифицирует результат исследования независимо от активности используемых реагентов и автоматизированных средств измерения;
- Ref. T. — время контрольной плазмы в день исследования (сек).
Prothrombin Time (РТ) — протромбиновое время;
- дает общую характеристику внешнего (фVII) и общего (Ф X,V,II и I) путей
- коагуляции;
- является тестом лабораторного контроля лечения непрямыми антикоагулянтами.
Протромбиновый тест: коагуляционный тест, с помощью которого определяют время свертывания плазмы крови после добавления к ней смеси тканевого тромбопластина и кальция. Результаты представляются в различной форме:
- % — протромбин по Квику позволяет определять активность факторов протромбинового комплекса плазмы обследуемого в сравнении с измеренным протромбиновым временем контрольной плазмы. Такой способ представления результатов является более точным, чем расчет протромбинового индекса, особенно в области низких значений.
- INR (МНО) — International Normalized Ratio (Международное нормализованное отношение) дополнительный способ представления результатов протромбинового теста, рекомендованный для контроля терапии непрямыми антикоагулянтами комитетом экспертов ВОЗ, Международным комитетом по изучению тромбозов и гемостаза и Международным комитетом по стандартизации в гематологии. МНО и протромбин по Квику коррелируют отрицательно — снижение протромбина по Квику соответствует повышению МНО.
- Ref. T. — время контрольной плазмы в день исследования (сек),
- сек — результат обследуемого. Такое представление результата не позволяет проводить сравнительную оценку результатов, полученных в разное время в разных лабораториях с использованием различных методов и аппаратуры, а главное — препаратов тромбопластина, различающихся по происхождению и активности.
Fibrinogen (FIB) — фибриноген;
- дает информацию об основном коагуляционном субстрате.
Thrombin Time — тромбиновое время;
- характеризует конечный этап процессов свертывания крови (скорость превращения
- фибриногена в фибрин).
STA-LIATEST D-DI — Д-димеры;
- ранний маркер тромбоза.
AT III — антитромбин III;
- основной эндогенный антикоагулянт, ингибитор плазменных факторов
- cвертывания крови, плазменный кофактор гепарина;
- характеризует баланс свертывающей и противосвертывающей систем.